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熱帶假絲酵母

 熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)即熱帶念珠菌,是常見的假絲酵母。迄今為止,已發現有270余種念珠菌,其中引起人類致病的念珠菌主要有白色念珠菌(C.albicans)、熱帶念珠菌(C.tropical)、假熱帶念珠菌(C.pseudotropicalis)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)、克柔念珠菌(C.kruseii)、星形念珠菌(C.stellatoidea)、光滑念珠菌(C.glabrata)、高里念珠菌(C.guilliermondii),均為條件致病菌,其中以白色念珠菌毒力最強,也最常見。念珠菌在普通培養基上生長較快,為橢圓形芽生細胞,在特殊培養基上形成菌絲。菌種的鑒別需依靠生化試驗。

 
一、菌種簡介
菌株名稱:熱帶假絲酵母
別  稱:熱帶念珠菌
界:真菌界
門:子囊菌門
亞  門:酵母亞門
綱:酵母綱
其它編號:AS2.637
培養基編號:13
培養溫度:25-28
培養時間:48h
用途:飼料酵母
注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。
 
二、生存環境
熱帶念珠菌是一種腐物寄生菌,廣泛存在于自然界,可從水果、蔬菜、乳制品、土壤中分離出。也可存在于健康人體的皮膚、陰道、口腔和消化道等部位。約10%的健康婦女和30%的孕婦可無任何臨床癥狀而陰道內帶有念珠菌。當機體抵抗力降低或陰道局部環境發生改變時,熱帶念珠菌就大量繁殖,產生病變。所以,熱帶念珠菌是一種條件致病菌。 10%~20%非孕婦女及30%孕婦陰道中有此菌寄生但菌量極少鵻,呈酵母相,并不引起癥狀。熱帶念珠菌生長最適宜的pH值為5.5,陰道的弱酸性環境能保持陰道的自潔功能,正常人為3.7-4.5,但陰道的弱酸性改變為pH5.5后,熱帶念珠菌大量繁殖,并轉變為菌絲相鵻,才引發陰道炎癥狀。
 
三、系統位置
真菌界  半知菌亞門  芽孢菌綱  隱球酵母目  隱球酵母科  念珠菌屬  熱帶念珠菌
 
四、菌株形態
是一種雙相型單細胞酵母菌,熱帶念珠菌(C.tropicalis)是生殖器念珠菌病的第二病原菌。為芽生,有假菌絲,有厚壁孢子、無子囊。一般情況下呈卵圓形 的單壁細胞。大小為2μm X 6μm,成群分布,尚可見分隔的假菌絲,革蘭染色陽性。熱帶念珠菌在人體中可見到不同期表現,無癥狀時為酵母型,呈圓形或橢圓形;在侵犯黏膜組織致病時,常表現為菌絲型,為長條型的假菌絲。
 
五、檢查方法
念珠菌顯色培養基根據酶底物法,通過顯色來區別不同念珠菌,25-28培養48小時后,白色念球菌藍綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色或鐵藍色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。  
用法:稱取本品9.6g(可按4.8g/100ml的比例擴大或縮小),加入200ml蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過1分鐘。將加熱后的培養基水浴冷卻至45-50,輕輕地搖勻,傾入無菌平皿(9cm的15ml/皿,7cm的10ml/皿),瓊脂完全凝固后,在36±1的培養箱中倒置放置0.5-1小時,備用。  
 
操作步驟:
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;  
2、取樣品液涂布或劃線接種于平板上;  
3、25-28培養48h。白色念珠菌典型特征為藍綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色或鐵藍色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑制。  
4、對可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-28培養24-48小時,挑取單菌落做鏡檢和生化試驗。
 
六、培養方法
在葡萄糖—酵母汁—蛋白胨液體培養基中培養,25,3天,細胞呈球形或卵球,其中大小為4~8×6~11µm。在麥芽汁瓊脂上菌落為白色到奶油色,無光澤或稍有光澤。軟而平滑或部分有皺紋。培養時間長時,菌落變硬。在加蓋玻片的玉米粉瓊脂培養基上培養,可看到大量的假菌絲和芽生孢子。
熱帶假絲酵母氧化烴類的能力強,在230~290石油餾分的培養基中,經22h后,可得到相當于烴類重量92%的菌體。所以,是生產石油蛋白質的重要菌種。用農副產品和工業廢棄物也可培養熱帶假絲酵母。如用生產味精的廢液培養熱帶假絲酵母作飼料,既擴大了飼料來源,又減少了工業廢水對環境的污染。
 
七、快速鑒定
以傳統發酵法檢測光滑念珠菌、白念珠菌、熱帶念珠菌發酵海藻糖情況。采用4%海藻糖液孵育各試驗株3小時后用尿糖試紙檢測。E-test法測試光滑念珠菌對氟康唑、伊曲康唑的敏感性。結果:光滑念珠菌與熱帶念珠菌皆可發酵海藻糖,尿糖試紙呈陽性反應,但后者菌落在科瑪嘉色原培基為藍色,在米粉吐溫瓊脂有假菌絲。結論:采用海藻糖法配合米粉吐溫瓊脂或科瑪嘉色原培養基可以快速簡便鑒定光滑念珠菌和熱帶念珠菌。
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