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Y187 Strain
Y187 Strain
規(guī)格:
貨期:
編號(hào):B98230
品牌:Mingzhoubio

標(biāo)準(zhǔn)菌株
定量菌液
DNA
RNA

規(guī)格:
凍干粉
斜面
甘油
平板


產(chǎn)品名稱 Y187 Strain
商品貨號(hào) B98230
規(guī)格 100μl
儲(chǔ)存 -20℃
基因型 MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ, URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ, MEL1
基本信息 培養(yǎng)基:YPDA 菌株類別:酵母雜交菌 培養(yǎng)條件:28℃,有氧,YPDA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:PEG/liAC;電轉(zhuǎn) 保存方式:30%甘油,-20℃ 基本應(yīng)用:酵母雙雜交
菌株簡(jiǎn)介 Y187菌株是Clontech公司開(kāi)發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母單雜,雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株,MATα型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATa型酵母菌株(Y2HGold,AH109等)通過(guò)mating操作進(jìn)行篩庫(kù)試驗(yàn)。,Transformation marker為: trp1, leu2,報(bào)告基因?yàn)椋簂acZ, MEL1。Y187 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為T(mén)RP1,用于表達(dá)DNA-BD(來(lái)自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白;質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為L(zhǎng)EU,用于表達(dá)AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4系統(tǒng)原理:一個(gè)完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨(dú)立的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域:位于N端1 ~ 174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881 位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識(shí)別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并與之結(jié)合。而AD可以啟動(dòng)UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨(dú)存在不能激活轉(zhuǎn)錄,但當(dāng)二者接近時(shí),則呈現(xiàn)完整的GAL4活性,使含有UAS的啟動(dòng)子下游基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。正常條件下,BD不與AD結(jié)合,將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合,形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和 prey 融合蛋白(prey-AD),如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用,就會(huì)促使 BD 和 AD 的相互接近,形成完整的GAL4,從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。Y187有兩個(gè)報(bào)告基因:lacZ, MEL1,分別由兩種不同的啟動(dòng)子(G1,M1)啟動(dòng),這兩種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp核心區(qū)相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率.Y187菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),使用30%的甘油保藏菌種。
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
周經(jīng)理 17757487661 1296385441
于經(jīng)理 18067160830 2088210172
沈經(jīng)理 19548299266 2662369050
李經(jīng)理 13626845108 972239479
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