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貨號：MZ-0122
名稱：NCI-H854

貨號：MZ-0118
名稱：HT29 MTX E12

貨號：MZ-0050
名稱：NCM460

貨號：MZ-0003
名稱：A549+LUC

貨號：MZ-0108
名稱：BSR-T7/5 BHK-21

貨號：MZ-2263
名稱：CAL-33

貨號：MZ-2226
名稱：HSF-SV40T

貨號：MZ-2206
名稱：HUVEC-SV40T

貨號：MZ-2203
名稱：人牙齦成纖維細胞永生化

貨號：MZ-7052
名稱：ES-E14TG2a細胞

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0574-87157013
mingzhoubio@163.com
浙江省寧波市鎮(zhèn)海區(qū)莊市街道興莊路9號
創(chuàng)e慧谷42號樓B幢401室

產(chǎn)品名稱	RCM-SV40-GFP
商品貨號	MZ-336149
中文名稱	永生化大鼠心肌細胞綠色熒光株
組織來源	大鼠心臟
形態(tài)特征	纖維狀
生長特性	貼壁
細胞污染	HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
培養(yǎng)條件	高糖DMEM+10%FBS
傳代方法	1:2
細胞凍存步驟	待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復(fù)蘇細胞步驟	將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代步驟	如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存條件	90%FBS+10%DMSO

序號	文章標題	操作
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