| 產(chǎn)品名稱 |
永生化人毛乳頭細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-0300 |
| 中文名稱 |
永生化人毛乳頭細(xì)胞 |
| 組織來源 |
永生化人毛乳頭細(xì)胞采用酶解法和基因轉(zhuǎn)染制備而來 |
| 特征特性 |
毛乳頭是細(xì)胞中高活性的團(tuán)體。它來源于真皮的間葉細(xì)胞，位于毛囊的基部。毛乳頭能控制頭發(fā)生長的周期，誘導(dǎo)表皮毛囊發(fā)育并生成毛發(fā)纖維。培養(yǎng)早期，毛乳頭細(xì)胞能誘導(dǎo)毛發(fā)體外生長，但進(jìn)一步培養(yǎng)，該特性消失。毛發(fā)生長受到毛囊細(xì)胞與間葉上皮細(xì)胞間相互作用的調(diào)節(jié)。例如：毛乳頭細(xì)胞分泌的B干擾素抑制體外培養(yǎng)中外根鞘細(xì)胞的生長。毛乳頭細(xì)胞的存在也受到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響，激活的ERK和Akt促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞存活。 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
永生化人毛乳頭細(xì)胞完全培養(yǎng)基 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。明舟生物按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復(fù)蘇細(xì)胞步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
