| 產品名稱 |
人關節(jié)滑膜成纖維細胞(正常組織) |
| 商品貨號 |
MZ-4139 |
| 組織來源 |
正常關節(jié)組織；人 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細胞形態(tài) |
成纖維細胞樣 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
滑膜是關節(jié)囊的內層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結締組織組成。關節(jié)腔內的所有結構，除關節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。 滑膜分泌滑液，在關節(jié)活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層，即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層)，是血管豐富的關節(jié)囊內膜，貼附于非關節(jié)面部分，覆蓋于關節(jié)囊內的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為邊緣區(qū)或“裸區(qū)”。滑膜呈粉紅色，光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內含膠原性纖維。 滑膜細胞有A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿膜內陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，具有吞噬功能；B型成纖維 樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內質網(wǎng)結構，是介導 RA 關節(jié)破壞的主要細胞。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
