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人原代小腸粘膜上皮細胞
人原代小腸粘膜上皮細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-4244
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人原代小腸粘膜上皮細胞
商品貨號 MZ-4244
組織來源 正常人小腸組織
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
培養基 建議購買人原代小腸粘膜上皮細胞專用培養基
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。一般根據形態和結構變化將小腸分為三段,分別為十二指腸,空腸和回腸。 小腸壁結構一般分4層,由外向內依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結締組織,又稱為固有層。最后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的粘膜。小腸粘膜有縱行和橫行皺襞,并有無數細小的指狀突起,稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內陷成管狀,稱為利貝屈恩氏隱窩。隱窩基底部的上皮細胞不斷地進行有絲分裂,產生新細胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細胞,它分泌粘液,起滑潤食物和保護粘膜的作用。細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要功能 (1) 小腸粘膜上皮細胞分泌腸液,潤滑腸管,易于食物向下運動。 (2) 小腸粘膜上皮皺襞很多,有效擴大小腸吸收面積,易于食物營養的吸收。
主要病生理變化 (1) 腸炎。 (2) 小腸息肉。 (3) 腸癌。
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