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人胰腺癌組織源性原代細胞
人胰腺癌組織源性原代細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-4274
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人胰腺癌組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4274
組織來源 中國成年病人手術后的胰腺癌組織
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
臨床分期 胰腺癌分期標準很多,各有其代表性,亦能反應其特點,關鍵的問題還是有無淋巴結轉移。
病理分型 1、導管腺癌:導管腺癌占胰腺癌的80%~90%,主要由分化不同程度的導管樣結構的腺體構 成,伴有豐富的纖維間質。有腺腔樣分化的區(qū)域,可有少量粘液,腫瘤的間質含有豐富的和 Ⅳ型膠原。 2、特殊類型的導管起源的癌: (1)多形性癌:亦稱巨細胞癌。 (2)腺鱗癌:偶見于胰腺,可能為胰管上皮鱗化惡變的結果。腫瘤由腺癌和鱗癌成分。純 粹的鱗癌在胰腺相當罕見。 (3)粘液癌:切面可呈膠凍狀,極相似于結腸的膠樣癌。 (4)粘液表皮樣癌和印戒細胞癌:在胰腺中偶可見到。 (5)纖毛細胞癌:形態(tài)與一般導管癌相同,其特點是有些細胞有纖毛。 3、腺泡細胞癌:僅占1%,腫瘤細胞呈多角形、圓形或矮柱形。核圓、常位于基底部。瘤細 胞排成腺泡狀或條索狀,胞漿強嗜酸性顆粒狀。 4、小腺體癌:為少見類型的胰腺癌,胰頭部較為多見。 5、大嗜酸性顆粒細胞性癌:此型腫瘤罕見,其腫瘤細胞具有豐富的嗜酸性顆粒性胞漿,核 圓形或卵圓形,排列成小巢狀。其間有纖維間隔分隔。 6、小細胞癌:胰腺小細胞癌形態(tài)上與肺小細胞癌相似,約占胰腺癌的1%~3%。由一致的 小圓細胞或燕麥樣細胞構成,胞漿很少,核分裂很多,常有出血壞死,NSE 免疫組化染色 陽性,此型預后很差。多在2 月內死亡。其起源尚不清楚
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