| 產(chǎn)品名稱 |
永生化人尿道成纖維細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-0396 |
| 中文名稱 |
永生化人尿道成纖維細(xì)胞 |
| 組織來(lái)源 |
永生化人尿道成纖維細(xì)胞采用酶解法和基因轉(zhuǎn)染制備而來(lái) |
| 特征特性 |
人尿道成纖維細(xì)胞是尿道壁結(jié)締組織中的主要細(xì)胞成分，屬于間充質(zhì)來(lái)源細(xì)胞，在尿道生理結(jié)構(gòu)維持、損傷修復(fù)及病理瘢痕形成中發(fā)揮核心作用。生理功能包括二個(gè)方面：1、結(jié)構(gòu)支撐作用，合成并維持尿道壁的細(xì)胞外基質(zhì)，為尿道提供機(jī)械強(qiáng)度和彈性，確保尿道形態(tài)穩(wěn)定；參與構(gòu)成尿道海綿體的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，支撐尿道上皮和平滑肌組織。2、調(diào)節(jié)與修復(fù)功能，分泌 FGF-7 等生長(zhǎng)因子，促進(jìn)尿道上皮細(xì)胞增殖和分化，維持尿道黏膜完整性；在尿道輕微損傷時(shí)，通過(guò)增殖和基質(zhì)重塑參與組織修復(fù)，維持尿道正常功能；與尿道平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞相互作用，調(diào)節(jié)尿道收縮和舒張功能。 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
永生化人尿道成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。明舟生物按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復(fù)蘇細(xì)胞步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
